简述采用基因工程技术生产胰岛素的操作步骤

讨厌你 2021-02-23 悬赏5金币 已收到1个回答
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hcal9166

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基因操作的基本步骤 进行基因操作一般要经历四个基本步骤,也就是基因操作的“四步曲”. 提取目的基因 基因操作的第一步,是取得人们所需要的特定基因,也就是目的基因(如图).如前 面提到的苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因,还有植物的抗病(抗病毒、抗细菌)基因、 种子的贮藏蛋白的基因,以及人的胰岛素基因、干扰素基因等,都是目的基因. 要从浩瀚的“基因海洋”中获得特定的目的基因,犹如大海捞针,是十分不易的.科学家们经过不懈地探索,想出了许多办法,概括地说,主要有两条途径：一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因；另一条是人工合成基因. 直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”.这种方法犹如用猎枪发射的散弹打鸟,无论哪一颗弹粒击中目标,都能把鸟打下来.鸟枪法的具体做法是：用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多片段,将这些片段分别载入运载体,然后通过运载体分别转入不同的受体细胞,让供体细胞所提供的DNA(外源DNA)的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制(在遗传学中叫做扩增),从中找出含有目的基因的细胞,再用一定的方法把带有目的基因的DNA片段分离出来.如许多抗虫、抗病毒的基因都可以用上述方法获得. 用“鸟枪法”获取目的基因的缺点是工作量大,具有一定的盲目胜.又由于真核细胞的基因含有不表达的DNA片段,不能直接用于基因的扩增和表达,因此,在获取真核细胞中的目的基因时,一般是用人工合成基因的方法. 目前人工合成基因的方法主要有两条途径.一条途径是以目的基因转录成的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成双链DNA,从而获得所需要的基因.另一条途径是根据已知的蛋白质的氨基酸序列,推测出相应的信使RNA序列,然后按照碱基互补配对原则,推测出它的结构基因的核苷酸序列,再通过化学的方法,以单核苷酸为原料合成目的基因(如图).如人的血红蛋白基因、胰岛素基因等就可以通过人工合成基因的方法获得.
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