(2014•石景山区一模)如图为采用基因工程技术生产海参溶菌酶(SL)的流程.请据图回答:

(2014•石景山区一模)如图为采用基因工程技术生产海参溶菌酶(SL)的流程.请据图回答:

(1)过程I中首先在______作用下合成海参溶菌酶cDNA,再以cDNA为模板扩增合成SL目的基因,扩增过程中要用到具有热稳定性的______.
(2)过程Ⅱ中要用相同的______切割目的基因与______,再用______将二者连接起来,再导入大肠杆菌中,形成大肠杆菌工程菌.
(3)若要检验SL目的基因是否成功表达,可以用______技术,若没有出现相应的杂交带.则需要用______做探针来检验是否转录出mRNA.
(4)已知海参溶菌酶中含145个氨基酸,则控制其合成的基因中至少含有______个脱氧核苷酸.
(5)溶菌酶广泛存在于动物的组织、体液及分泌物中,可以破坏细菌的细胞壁,促进细菌细胞的裂解,在动物的______中发挥重要作用.
奈离愁 2021-02-23 悬赏5金币 已收到1个回答

xgigo

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解题思路:以RNA为模板合成DNA的过程称为逆转录,该过程需要逆转录酶的催化;扩增目的基因采用的方法是PCR技术,该过程需要耐高温的DNA聚合酶;割目的基因和切割质粒最好使用同种限制酶,然后用DNA连接酶将产生的末端连接.检测目的基因是否表达,就是检测是否合成相应的蛋白质,因此可采用抗原-抗体杂交;检测目的基因是否成功转录,可采用分子杂交,即用放射性同位素标记的目的基因做为探针与RNA混合,根据是否出现杂交带,判断目的基因是否转录出mRNA;基因中的碱基个数:蛋白质中氨基酸个数=6:1,因此基因中至少含有145×6=870个脱氧核苷酸;溶菌酶属于免疫中的第二道防线,在非特异性免疫中有重要作用.

(1)以RNA为模板合成DNA的过程称为逆转录,该过程需要逆转录酶的催化;扩增目的基因采用的方法是PCR技术,该过程需要耐高温的DNA聚合酶.
(2)切割目的基因和切割质粒最好使用同种限制酶,然后用DNA连接酶将产生的末端连接.
(3)检测目的基因是否表达,就是检测目的基因是否合成相应的蛋白质,因此可采用抗原-抗体杂交;检测目的基因是否成功转录,可采用分子杂交,即用放射性同位素标记的目的基因做为探针与RNA混合,根据是否出现杂交带,判断目的基因是否转录出mRNA.
(4)基因中的碱基个数:蛋白质中氨基酸个数=6:1,因此基因中至少含有145×6=870个脱氧核苷酸.
(5)溶菌酶属于免疫中的第二道防线,在非特异性免疫中有重要作用.
故答案为:
(1)逆转录酶DNA聚合酶
(2)限制性核酸内切酶(限制酶) 质粒DNA连接酶
(3)抗原-抗体杂交 带同位素的目的基因
(4)870
(5)非特异性免疫

点评:
本题考点: 基因工程的应用.

考点点评: 本题主要考查基因工程的过程和免疫的相关知识,尽管比较综合,但难度不高.在根据蛋白质中氨基酸个数计算基因中碱基的个数时,若不考虑终止密码子时,直接用氨基酸个数×6,即可,若考虑终止密码子,则还需要加6个脱氧核苷酸.

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